国产末成年女av片丨久久伊人少妇熟女大香线蕉丨中文字幕av一区二区五区丨亚洲第一区欧美国产不卡综合丨美女视频黄的大全免费一区

010-56256916

新聞資訊

NEWS INFORMATION

當前位置:首頁新聞資訊蛋白表達純化有關天然蛋白質的三個關鍵參數

蛋白表達純化有關天然蛋白質的三個關鍵參數

更新時間:2020-11-12點擊次數:1309
   對重組蛋白表達的常見問題是真核蛋白在細菌中表達時傾向于不溶。變性、聚集和/或截短形式的蛋白形成不可溶的包涵體,需要進一步純化和重折疊,這可能是低效的和不*的。
  與天然蛋白質表達的三個關鍵參數:
  1.IPTG濃度
  有可能宿主中的蛋白表達將通過lac操縱子系統操作。這個系統的詳細解釋可以在別處找到,加入異丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一種乳糖類似物,控制蛋白的表達。蛋白的表達應處于生長的對數期,即當溶液的波長600(OD 600)處的光密度達到0.4-0.6。如果目標是可溶性蛋白質,不要改變細胞中蛋白的折疊功能。已經假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侶的存在。因此,使用高濃度的IPTG(>1mM)可能不總是產生好的結果。嘗試幾個不同的濃度,看看哪一個給高的可溶性蛋白的產量。
  2.溫度
  偶爾可以在37℃的典型溫度下,通過生長和誘導分離可溶性形式的蛋白質,但通常情況下,溶解度在較低溫度下增強。可嘗試在30℃,25℃和18℃下進行誘導。
  注意:如果首先在37℃生長,先讓培養物冷卻到誘導溫度,再加入IPTG。
  3.誘導時間
  更長并不總是更好。對于對宿主有毒的蛋白尤其如此。在誘導期間,每隔幾個小時取樣,并檢查目的蛋白的表達。典型的誘導時間根據溫度而變化,對于37℃,嘗試4小時;對于30℃,進行5-6小時,并且任何低于25℃的溫度應該允許生長過夜。
熱線電話:010-56256916

關注公眾號

Copyright © 2025 安諾倫(北京)生物科技有限公司 版權所有    備案號:京ICP備16059737號-3

技術支持:化工儀器網    管理登錄    sitemap.xml

主站蜘蛛池模板: 荆州市| 吕梁市| 百色市| 家居| 普兰县| 广昌县| 铜山县| 郧西县| 巴青县| 宜兰县| 惠安县| 惠来县| 海晏县| 岑巩县| 罗江县| 邵武市| 安溪县| 临安市| 惠州市| 安达市| 舞阳县| 正阳县| 淮阳县| 合江县| 芜湖市| 皮山县| 武冈市| 开封县| 康定县| 苏尼特左旗| 云浮市| 林周县| 望江县| 桂东县| 青神县| 广宗县| 莆田市| 芮城县| 呼图壁县| 克山县| 都安|